يانوس جرين ب، الاسم الإنجليزي Janus Green، الصيغة الجزيئية C30H31ClN6، CAS 2869-83-2، هو مسحوق صلب أخضر في درجة حرارة الغرفة والضغط. يبدو أنه قابل للذوبان في الماء ولكنه قابل للذوبان بشكل طفيف في المذيبات العضوية الكحولية. وهو ذو قابلية عالية للذوبان في الماء، خاصة عندما يذوب في الماء الساخن ويظهر باللون الأزرق. كما أنه قابل للذوبان بشكل طفيف في المذيبات الكحولية. هذه الخاصية تمكنه من الانتشار السريع وصبغ العينات البيولوجية. وهو عامل تلطيخ حي محدد يمكن استخدامه في تلطيخ الميتوكوندريا المباشر، وتلطيخ الفطريات والأوالي، وتلطيخ قسم الأجنة، وكذلك لمؤشرات الأكسدة والاختزال وإضافات الطلاء الكهربائي بالنحاس. وله تطبيقات جيدة في مجالات البحث الأساسية مثل الكيمياء الحيوية والأصباغ الفلورية. ويحتوي تركيبه الجزيئي على أصباغ الآزو، مما يجعله صبغة عضوية فعالة. كما أن الشحنة الموجبة في تركيبها الجزيئي تجعل لها قيمة تطبيقية معينة في مواد الطلاء الكهربائي.

|
|
|
|
الصيغة الكيميائية |
C30H31ClN6+ |
|
الكتلة الدقيقة |
510 |
|
الوزن الجزيئي |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
التحليل العنصري |
ج، 70.51؛ ح، 6.11؛ ن، 16.44؛ كل، 6.94 |

يانوس جرين بباعتبارها صبغة بيولوجية مهمة، لديها مجموعة واسعة من التطبيقات في مجالات متعددة.

1. في الجسم الحي تلطيخ الميتوكوندريا
الاستخدام الأكثر شهرة-هو كعامل تلوين حي خاص بالميتوكوندريا. الميتوكوندريا هي "مصانع الطاقة" في الخلايا، المسؤولة عن إنتاج جزيئات الطاقة مثل ATP للحفاظ على أنشطة الحياة الخلوية. يمكن أن يصبغ الميتوكوندريا على وجه التحديد، مما يجعلها تظهر باللون الأزرق-الأخضر تحت مجهر عالي القوة-، بينما يكون السيتوبلازم عديم اللون تقريبًا. هذه الخاصية تلطيخ تمكن الباحثين من مراقبة توزيع الميتوكوندريا في الخلايا ومورفولوجيتها وكميتها بوضوح، وهو أمر ذو أهمية كبيرة لدراسة الوظيفة والتمثيل الغذائي والعلاقة مع أمراض الميتوكوندريا.
2. تلطيخ الفطريات والطفيليات
بالإضافة إلى تلطيخ الميتوكوندريا، يمكن استخدامه أيضًا لتلطيخ الفطريات والأوالي. تعد الفطريات والطفيليات كائنات مهمة في الأبحاث البيولوجية والطبية، كما أن شكلها وبنيتها وخصائصها الفسيولوجية ضرورية لفهم عمليات الحياة وآليات المرض. خصائصه الملونة تجعل من السهل مراقبة هذه الكائنات الصغيرة والتعرف عليها تحت المجهر، مما يوفر دعمًا قويًا للأبحاث ذات الصلة.


3. تلطيخ قسم الجنين
في أبحاث علم الأحياء التنموي وعلم الأجنة، يعد تلوين قسم الجنين وسيلة مهمة لفهم عملية تطور الجنين والتغيرات الهيكلية. ويمكن استخدامه لتلوين شرائح الأجنة لمساعدة الباحثين على مراقبة وتحليل بنية الأنسجة الخلوية والخصائص المورفولوجية للأجنة في مراحل النمو المختلفة. وهذا له أهمية كبيرة لفهم الآليات التنظيمية لتطور الجنين، وحدوث الأمراض الوراثية، وقضايا الصحة الإنجابية.
4. مؤشر الأكسدة والاختزال
كما أنه يشتمل أيضًا على وظيفة مؤشر اختزال-الأكسدة. في التفاعلات الكيميائية، غالبًا ما تكون حالات الأكسدة والاختزال للمواد مصحوبة بتغيرات في اللون. في ظل حالات الأكسدة والاختزال المختلفة، فإنه سيظهر ألوانًا مختلفة، وبالتالي يمكن استخدامه كمؤشر لتفاعلات الأكسدة والاختزال. هذه الخاصية تجعلها ذات قيمة تطبيقية محتملة في مجالات مثل التحليل الكيميائي، والرصد البيئي، وصناعة الأغذية.


بدءًا من 4-أمينو-N، N- ثنائي إيثيلانيلين أو p- فينيلينيديامين (يحتوي على N، N- ثنائي إيثيلانيلين)، يتم الحصول على الميثيلين البنفسجي 3RAX عن طريق التدوير مع الأنيلين في وجود عامل مؤكسد. تبعًا،يانوس جرين بيتم تحضيره عن طريق الديازوتة وتفاعل الاقتران.
المادة الأولية: بافتراض أننا نستخدم 4-amino-N, N-ثنائي إيثيلانيلين كمادة البداية الرئيسية. قد تتطلب حالة p- فينيلينيديامين (التي تحتوي على N، N- داي إيثيل أنيلين) خطوات إضافية لفصل أو تصنيع N، N - ثنائي إيثيل بديل p- فينيلينيديامين المرغوب فيه، ولكننا نركز هنا على حالة مادة أولية واحدة.
الهدف: تحويل 4-amino-N, N-ثنائي إيثيلينلين مع الأنيلين أو مركبات أخرى مناسبة لتكوين بنية حلقية بنزوهية غير متجانسة مشابهة للميثيلين البنفسجي 3RAX. أولاً، يتم تحويل 4-amino-N، N-diethylaniline إلى مادة وسيطة قابلة للتدوير بسهولة أكبر من خلال بعض الوسائل مثل الأسيلة، والتكثيف، وما إلى ذلك، ثم يتم تدوير الوسيط باستخدام الأنيلين.
رد فعل مثال (غير مباشر، فقط للتوضيح):
تفاعل الأسلة (تكوين وسيط أميد): 4-أمينو-N، يتفاعل ثنائي إيثيل أنيلين N مع كلوريد الأسيل أو أنهيدريد لإنتاج الأميد المقابل.
4-أمينو-N، N-ثنائي إيثيلانيلين+كلوريد الأسيل → وسط أميد+حمض الهيدروكلوريك
التفاعل الحلقي (الفرضية): يتم تدوير وسيط الأميد مع الأنيلين تحت ظروف المحفز و/أو التسخين.
أميد وسيط + أنيلين → وسيط يشبه الميثيلين البنفسجي 3RAX
الغرض: التأكد من أن الوسيط يحتوي على أمينات أولية عطرية لتفاعلات الأزوتة اللاحقة.
مثال للتفاعل (إذا كان الوسيط عبارة عن أمين أساسي عطري بالفعل، فتخطي هذه الخطوة):
إذا لم يكن الوسيط أمينًا أوليًا عطريًا، فقد يلزم تحويله إلى أمين أولي عطري من خلال الاختزال، أو التحلل المائي، أو تفاعلات أخرى.
أمين غير أساسي وسيط + عامل اختزال / عامل تحلل مائي ← أمين أساسي عطري وسيط
الهدف: تحويل الأمينات الأولية العطرية الوسيطة إلى أملاح الديازونيوم.
المعادلة الكيميائية:
أمين أولي عطري وسيط + حمض النيتروز + حمض ← ملح الديازونيوم + ماء
ملحوظة: يتم إجراء تفاعل الديازوتة عادةً عند درجات حرارة منخفضة (مثل أقل من 0 درجة مئوية) وتحت ظروف حمضية لمنع تحلل أملاح الديازونيوم.
الهدف: مزج أملاح الديازونيوم مع مركبات الأمين الفينولية أو العطرية المناسبة لتكوين جيانا جرين ب.
المعادلة الكيميائية (مثال): أملاح الديازونيوم+مركبات الأمين الفينولية أو العطرية → C30H31ClN6+بواسطة-منتجات
ملحوظة: يتم إجراء تفاعلات الاقتران عادة في ظل ظروف قلوية لتعزيز تكوين منتجات الاقتران. يعد اختيار مركبات الأمين الفينولية أو العطرية المناسبة أمرًا بالغ الأهمية للحصول على المنتج المستهدف، Jianna Green B.
خطوات إضافية: التنقية والمعالجة اللاحقة-.
الهدف: عزل وتنقية جيانا جرين ب من خليط التفاعل.
الطريقة: قد يشمل ذلك تقنيات مثل استخلاص المذيبات، والتبلور، وإعادة التبلور، والفصل الكروماتوغرافي (مثل كروماتوغرافيا العمود، وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة، وHPLC، وما إلى ذلك).
تنبيه: خطوات التنقية وما بعد المعالجة-تعتبر ضرورية للحصول على منتجات مستهدفة عالية النقاء-. في المختبر، قد تحتاج هذه الخطوات إلى تكرارها عدة مرات لتحسين الإنتاجية والنقاء.
في التجارب البيولوجية،يانوس جرين بيستخدم على نطاق واسع كعامل تلطيخ حي شائع الاستخدام لمراقبة مورفولوجيا الميتوكوندريا وتوزيعها. تتيح خصائص الصبغة الفريدة للميتوكوندريا إمكانية تمييزها بوضوح تحت المجهر، مما يجعلها أداة مهمة في أبحاث بيولوجيا الخلية. فيما يلي شرح تفصيلي لكيفية تحضير جزء عالي الجودة بنسبة 1% من محلول صبغ Jianna Green B. لا تتضمن هذه العملية الوزن الدقيق وإذابة الكواشف الكيميائية فحسب، بل تتضمن أيضًا دراسة متأنية لعوامل مثل درجة الحرارة واختيار المذيبات لضمان أن يكون محلول الصبغة النهائي مستقرًا وفعالاً.
|
|
|
|
|
التحضير التجريبي
المواد والكواشف
مسحوق Jianna Green B: تأكد من أن مسحوق Jianna Green B الذي تم شراؤه عالي النقاء وخالي من الشوائب، وهو الأساس لتحضير محاليل صبغية عالية الجودة-.
المحلول الملحي الفسيولوجي: غالبًا ما يستخدم المحلول الملحي الفسيولوجي، المعروف أيضًا باسم محلول كلوريد الصوديوم بنسبة 0.9٪، كمذيب في التجارب البيولوجية لتقليل تلف الخلايا بسبب تشابه ضغطه الأسموزي مع ضغط الخلايا البشرية. في هذه التجربة، تم استخدام محلول ملحي فسيولوجي كوسيلة إذابة لـ Jianna Green B.
أسطوانة القياس: تستخدم لقياس المحلول الملحي الفسيولوجي بدقة.
الدورق: يستخدم لتذويب مسحوق Jianna Green B.
محرك مغناطيسي (اختياري): يستخدم لتسريع عملية الذوبان والتأكد من توزيع المسحوق بالتساوي في المذيب.
مقياس درجة الحرارة: يستخدم لمراقبة درجة الحرارة والتحكم فيها أثناء عملية الذوبان.
ميزان إلكتروني: يستخدم للوزن الدقيق لمسحوق Jianna Green B.
دورق حجمي (اختياري): إذا كنت ترغب في دقة أعلى، يمكن استخدام دورق حجمي لتحديد الحجم. لكن في طريقة التحضير البسيطة هذه، يمكن استخدام الدورق وأسطوانة القياس مباشرة.
قنينة زجاجية بنية اللون: تستخدم لتخزين محلول صبغة Jianna Green B المُجهز. يمكن للزجاجة البنية أن تمنع تأثير الضوء على محلول الصبغة وتحافظ على ثباته.
حماية السلامة
ارتداء معاطف المختبر: حماية الملابس من التلوث الكيميائي.
ارتداء القفازات: منع ملامسة الجلد مباشرة للكواشف الكيميائية.
ارتداء نظارات واقية: لمنع تناثر المحلول في العين.
التشغيل في غطاء الدخان: ضمان دوران الهواء في المختبر وتقليل تراكم الغازات الضارة.
خطوات التحضير
قم بوزن 0.5 جرام من مسحوق Jianna Green B بدقة باستخدام ميزان إلكتروني. لاحظ أنه يجب معايرة الميزان قبل الوزن لضمان الوزن الدقيق.
قم بصب مسحوق Jianna Green B الموزون بعناية في دورق نظيف لمنع المسحوق من التطاير.
قم بقياس 50 مل من المحلول الملحي الفسيولوجي بدقة باستخدام أسطوانة مدرجة. لاحظ أنه عند القياس يجب وضع أسطوانة القياس على سطح ثابت، بحيث يكون خط البصر مع أدنى نقطة لمستوى السائل لضمان دقة القياس.
صب ببطء المحلول الملحي الفسيولوجي المقاس في كوب يحتوي على مسحوق Jianna Green B. لاحظ أنه يجب سكبه ببطء على طول جدار الدورق لتجنب تناثر السائل أو توليد الكثير من الرغوة.
قم بتحريك المحلول بلطف باستخدام قضيب زجاجي للمساعدة في إذابة مسحوق Jianna Green B. إذا سمحت الظروف، يمكن استخدام محرك مغناطيسي للتحريك لتحسين كفاءة الذوبان.
أثناء عملية التحريك، انتبه إلى ملاحظة تغير لون المحلول. عندما يذوب Jianna Green B، يجب أن يتحول المحلول تدريجيًا إلى اللون الأخضر الداكن أو الأزرق-الأخضر.
نظرًا لقابلية ذوبان Jianna Green B المحدودة في درجة حرارة الغرفة، ومن أجل تحسين كفاءة الذوبان، يمكن تسخين الدورق في حمام مائي إلى 30-40 درجة مئوية. لاحظ أن درجة الحرارة لا ينبغي أن تكون مرتفعة جدًا أثناء التسخين لتجنب إتلاف التركيب الكيميائي لـ Jianna Green B أو التسبب في تبخر المذيبات بشكل مفرط.
أثناء عملية التسخين، استمر في تحريك المحلول حتى يذوب مسحوق Jianna Green B تمامًا ويصبح المحلول موحدًا وشفافًا.
بعد الذوبان، تحقق من لون وشفافية الحل. إذا كانت هناك جزيئات غير مذابة أو لون غير متساو في المحلول، فيجب الاستمرار في التحريك أو التسخين المناسب حتى يتم حل المشكلة.
إذا كان من الضروري ضبط تركيز المحلول، فيمكن زيادة أو تقليل كمية المحلول الملحي الفسيولوجي أو مسحوق Jianna Green B بشكل مناسب وفقًا للحالة الفعلية. ولكن في طريقة التحضير هذه، قمنا بوزن الكاشف بدقة وفقًا لكسر كتلي قدره 1%، لذلك لا يلزم عادةً إجراء تعديلات إضافية.
صب محلول صبغة Jianna Green B المحضر في قنينة زجاجية بنية اللون وقم بإغلاقها بإحكام لمنع التلوث والتطاير.
قم بتسمية الزجاجة بالاسم والتركيز وتاريخ التحضير واسم المستخدم لمحلول الصبغة لاستخدامه وإدارته في المستقبل.
احتياطات
الوزن الدقيق:
يعد ضمان القياس الدقيق لمسحوق B الأخضر الصحي والمحلول الملحي الفسيولوجي هو المفتاح لإعداد محاليل صبغية عالية الجودة-.
01
التحكم في درجة الحرارة:
أثناء عملية التسخين، يجب التحكم في درجة الحرارة بشكل صارم لتجنب التأثيرات الضارة على جودة محلول الصبغة الناتجة عن درجات الحرارة المرتفعة أو المنخفضة بشكل مفرط.
02
التحريك الكافي:
يعد التحريك خطوة أساسية لضمان ذوبان مسحوق B الأخضر بشكل موحد في محلول ملحي فسيولوجي، ويجب أن يستمر حتى يصبح المحلول موحدًا وشفافًا.
03
التشغيل الآمن:
اتبع بدقة لوائح سلامة المختبرات طوال عملية التحضير بأكملها لضمان السلامة الشخصية وسلامة البيئة التجريبية.
04
الاستخدام في الوقت المناسب:
قد يؤدي التخزين طويل الأمد لمحلول الصبغة المحضرة إلى انخفاض تأثير الصباغة أو تغيرات كيميائية أخرى. يوصى باستخدامه في أسرع وقت ممكن بعد التحضير لضمان أفضل تأثير تلطيخ.
05
التعليمات
1. ما هو يانوس جرين ب؟
Janus Green B عبارة عن صبغة أساسية مصنّعة تعتمد على الفينازين-، والتي تستخدم بشكل شائع في الصبغ البيولوجي (مثل الصبغ المباشر للميتوكوندريا) وكمؤشر لاختزال الأكسدة-.
2. ما هي الأغراض الرئيسية؟
تستخدم بشكل رئيسي في التجارب البيولوجية:
- الصبغ المباشر للميتوكوندريا (حيث يمكن لنظام الغشاء الداخلي للميتوكوندريا إعادتها إلى حالة عديمة اللون، مما يكشف عن نشاط الأكسدة والاختزال).
- اكتشاف التنفس الخلوي (كمؤشر اختزال الأكسدة-، يشير اللون الأزرق إلى حالة الأكسدة، ويشير اللون عديم اللون إلى حالة الاختزال).
- كما يمكن استخدامه كصبغة للحرير والجلود في الصناعة.
3. ما هو مبدأ تلطيخ؟
في الميتوكوندريا، يتم تحويل يانوس جرين بي إلى منتج عديم اللون بواسطة إنزيمات موجودة على الغشاء الداخلي (مثل السيتوكروم سي أوكسيديز) داخل الميتوكوندريا؛ وبعد خروجها من الميتوكوندريا،{0}تتم إعادة أكسدتها بواسطة الأكسجين إلى اللون الأزرق. يمكّنه تفاعل الأكسدة والاختزال القابل للعكس من الإشارة على وجه التحديد إلى نشاط الميتوكوندريا.
4. ما الذي يجب ملاحظته عند الاستخدام؟
- يلزم التحكم في تركيز الصبغة ووقتها (عادةً 0.01%-0.02%)، لتجنب التلطيخ المفرط الذي قد يتداخل مع نشاط الخلية.
- بالنسبة لبعض أنواع الخلايا، قد لا يكون تأثير الصبغ مرضيًا. الظروف تحتاج إلى الأمثل.
- قم بتخزينه في حاوية مظلمة ومغلقة لمنع التحلل.
الوسم : يانوس جرين ب كاس 2869-83-2، الموردين، الشركات المصنعة، مصنع، بالجملة، شراء، السعر، السائبة، للبيع








