كاشف IPTG CAS 367-93-1

كاشف إيبتجنحن نركز على تكنولوجيا التخليق العضوي منذ عام 2008، ويمكننا تطوير منتجات عالية الجودة-، اعتمادًا كليًا على فريق البحث والتطوير الرائع لدينا. IPTG، CAS 367-93-1، التركيب الكيميائي يتكون من الأيزوبروبيل - ويتكون من D- مجموعات ثيوجالاكتوزيد والفوسفات. من بينها - D-thiogalactoside هو نظير للجلاكتوز، حيث تحل ذرة الكبريت محل ذرة الأكسجين. يسمح هيكل الجليكوسيد الخاص هذا لـ IPTG بالارتباط بالحمض النووي والحث على التعبير الجيني. IPTG لديه قابلية منخفضة للذوبان في الماء، ولكن يمكن أن يذوب جيدًا في محلول ملحي فسيولوجي وفوسفات. وهو حمضي بقيمة pKa تبلغ 4.5، وهو يرتبط بمجموعة الفوسفات في تركيبه الجزيئي. ليس من السهل أن تتبلور في الماء النقي، ولكن يمكن أن تتشكل بلورات في المحاليل عالية التركيز أو عند إضافة مركبات أخرى. نظرًا لقدرته على تحفيز التعبير البروتيني البكتيري، فإن IPTG حساس لبعض الكائنات الحية الدقيقة.

نحن لا نفعل أي شيء يخجل الكيمياء العظيمة! لا تثق في السعر غير المعقول، يرجى مقارنة السعر بنفس مستوى الجودة.

طريقة التخليق الحيويكاشف إيبتجيستخدم عادةً العمل التحفيزي للكائنات الحية الدقيقة أو الإنزيمات لتحويل الجالاكتوز إلى مجموعة الأيزوبروبيل - - D-ثيوغالاكتوزيد.

الجالاكتوز كمادة خام

أولا، من الضروري استخدام الجالاكتوز كمادة خام. الجالاكتوز هو سكر خماسي الكربون موجود على نطاق واسع في الطبيعة ويمكن الحصول عليه على شكل شراب أو بلورات. في عملية التخليق الحيوي، يتم تحويل الجالاكتوز إلى أيزوبروبيل من خلال سلسلة من التفاعلات الأنزيمية - - D- ثيوجالاكتوزيد.

الثقافة الميكروبية واستقلاب الجالاكتوز

بعد ذلك، من الضروري اختيار الكائنات الحية الدقيقة المناسبة كمحفزات، والتي تشمل عادة البكتيريا والخميرة والعفن. زراعة هذه الكائنات الحية الدقيقة في وسط الثقافة للسماح لها بالنمو والتكاثر في ظل ظروف مناسبة. وفي الوقت نفسه، يتم استهلاك الجالاكتوز، كمواد مغذية، بواسطة الكائنات الحية الدقيقة ويتم استقلابه إلى الوسيط المطلوب من خلال سلسلة من التفاعلات الأنزيمية. تختلف آلية التفاعل المحددة والمعادلة الكيميائية في هذه الخطوة حسب أنواع الكائنات الحية الدقيقة وظروف الزراعة.

ينتج عن تفاعل الأيزومرية مجموعة الأيزوبروبيل - - D-ثيوجالاكتوزيد-5 '- استر الفوسفات

تحت تأثير الإنزيمات التي تنتجها الكائنات الحية الدقيقة، تخضع المنتجات الوسيطة لتفاعل الأيزومرة، مما يؤدي إلى توليد مجموعات الأيزوبروبيل - - D-thiogalactoside-5 '- إستر الفوسفات. آلية التفاعل في هذه الخطوة هي نقل مجموعة الهيدروكسيل من الجلاكتوز إلى يوريدين ثلاثي الفوسفات، مما يؤدي إلى توليد مجموعة الأيزوبروبيل - - D-thiogalactoside-5 '- فوسفات وثنائي فوسفات اليوريدين. المعادلة الكيميائية المحددة هي كما يلي:

(الفصل₂أوه)₂CHOH-OH + C₃H₇كلن₂O₂S + UDP → (CH₂أوه)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

تقوم مجموعة إزالة الحماية بإنشاء مجموعة الأيزوبروبيل- - D-ثيوجالاكتوزيد

الخطوة الأخيرة هي إزالة المجموعة الواقية من مجموعة الأيزوبروبيل- - تحويل D-thiogalactosyl-5 '- إستر الفوسفات لاستهداف المنتج isopropyl- - D-thiogalactoside. تتطلب هذه الخطوة عادةً استخدام محلول حمضي أو قلوي كمحفز لتعزيز التفاعل. المعادلة الكيميائية المحددة هي كما يلي:

(الفصل₂أوه)₂CHOH-O-P(U) + H₂يا → (CH₂أوه)₂CHOH-OH + P (i)

الانفصال والتطهير

باستخدام تقنيات الفصل والتنقية مثل الاستخلاص، والامتزاز، والكروماتوغرافيا، وما إلى ذلك، تتم تنقية الأيزوبروبيل المنتج المستهدف - - D- وتم استخلاص ثيوجالاكتوزيد من خليط التفاعل. الغرض من هذه الخطوة هو إزالة الشوائب وتحسين نقاء المنتج لتلبية احتياجات التطبيقات العملية

كاشف إيبتجأيزوبروبيل- -D-ثيوجالاكتوزيد، الاسم الإنجليزي IPTG. باعتباره محفزًا وهميًا، فإن X-gal عبارة عن ركيزة مولدة للون، وكلاهما يستخدم لفحص اللون الأزرق-الأبيض. يمكن أن يحفز IPTG قطعة الحمض النووي لأوبرا lac لمتجه Chemicalbook لتجميع الجزء الطرفي الأميني - من - جالاكتوزيداز، والذي يمكن أن يحقق التكامل داخل الحلق (التكامل) مع جالاكتوزيداز - المعيب المشفر بواسطة الخلايا المضيفة.

1. إعداد المواد الحيوية:

يمكن استخدام IPTG لتحضير مواد حيوية معينة، مثل السكريات، والجسيمات الشحمية، وما إلى ذلك. ومن خلال الارتباط بأغشية خلايا أو بروتينات محددة، يمكن لـ IPTG تعزيز وظائف فسيولوجية محددة للخلايا أو الأنسجة، وتوفير أدوات بحثية جديدة واستراتيجيات علاجية لمجال الهندسة الطبية الحيوية. على سبيل المثال، باستخدام IPTG كمحفز، يمكنه تعزيز التعبير وإفراز البروتينات المستهدفة في هندسة البكتيريا أو خلايا الخميرة، والتي يمكن استخدامها لإنتاج مواد حيوية ذات وظائف محددة.

 

قد تشمل هذه المواد الحيوية السكريات، والجسيمات الشحمية، ومجمعات البروتين، وما إلى ذلك.
في عملية تحضير المواد الحيوية، يمكن أن يؤدي استخدام IPTG إلى تبسيط عملية الإنتاج وتحسين كفاءة الإنتاج وتقليل تكاليف الإنتاج. وفي الوقت نفسه، يمكن تحقيق تنظيم دقيق لمستويات التعبير البروتيني المستهدف وخصائص المواد الحيوية من خلال التحكم في كمية ومدة إضافة IPTG.

2. فحص المخدرات:

 

يستخدم IPTG بشكل أساسي في فحص الأدوية للحث على التعبير عن الجينات المستهدفة وفحص منتجات التعبير عن الجينات المستهدفة. على وجه التحديد، يمكن أن يعمل IPTG كمحفز لمشغلات اللاكتوز عن طريق الارتباط بـ lac|المنتجات، مما يسبب تغييرات متعلق بتكوين اللاك|المنتجات بعيدًا عن lacO، وبالتالي تنشيط النسخ وتحقيق تعبير عالٍ عن الجين المستهدف. أثناء عملية الفحص باللون الأبيض الأزرق، يتم تحفيز المحولات التي لا تحتوي على البلازميدات المؤتلفة بواسطة IPTG لتكوين مستعمرات زرقاء في وجود الركيزة الملونة X-gal.

عندما يتم إدخال شظايا أجنبية، يتم فقدان شظايا الببتيد الناتجة. القدرة التكميلية: يمكن للمواد المؤتلفة المحولة التي تحتوي على البلازميدات المؤتلفة أن تشكل فقط الإشريكية القولونية البيضاء على وسط التحريض اللوني. تلعب طريقة فحص الأدوية هذه بناءً على تغيرات اللون دورًا مهمًا في دراسة البروتينات المرتبطة بأمراض معينة والبحث عن أهداف دوائية جديدة.

3. البحوث الوراثية:

 

غالبًا ما يستخدم IPTG كأداة جزيئية في الأبحاث الجينية. من خلال الارتباط بتسلسل جيني محدد، يمكن لـ IPTG تنظيم مستوى التعبير عن ذلك الجين، وبالتالي دراسة علاقته بأنماط ظاهرية أو أمراض محددة.
في الأبحاث الجينية، يستخدم IPTG بشكل أساسي كمحفز ويمكنه محاكاة التأثير التعريفي لللاكتوز على اللاكتاز. وعادة ما يستخدم للحث على التعبير عن الجينات الخارجية، وخاصة في البيولوجيا الجزيئية وأبحاث الهندسة الوراثية.
عند استخدام IPTG، فإنه يرتبط باستهداف الجينات في مضيفات التعبير مثل الإشريكية القولونية. من خلال بناء الجين المستهدف باستخدام المروجين المناسبين والعناصر التنظيمية في ناقل التعبير، يمكنه إنتاج بروتينات في خلايا الإشريكية القولونية. هذا التأثير المستحث له أهمية كبيرة لدراسة وظيفة الجينات، وتفاعلات البروتين، وتطوير أدوية ومواد حيوية جديدة.

بالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضًا استخدام IPTG كمحفز في تجارب تبلور البروتين لتعزيز تبلور البروتين. آلية عملها هي تغيير شكل البروتينات عن طريق الارتباط بالمناطق الكارهة للماء في البروتينات، وبالتالي تعزيز التجميع والبلورة بين جزيئات البروتين.

عملية التجميع والبلورة هذه قابلة للعكس، لذلك يمكن تحفيز تبلور البروتين عن طريق إضافة IPTG، أو يمكن إذابة بلورات البروتين عن طريق إزالة IPTG.

4. التطبيق الزراعي:

 

في التطبيقات الزراعيةكاشف إيبتجكنوع جديد من المبيدات الحيوية، له تأثيرات محددة لمبيدات الأعشاب. يمكن أن يتداخل مع التمثيل الغذائي الطبيعي للجلاكتوز في النباتات، مما يؤثر على نموها الطبيعي. تعد طريقة التداخل هذه أكثر حساسية لبعض الحشائش، لذا فإن استخدام IPTG يمكن أن يزيل الأعشاب الضارة بشكل فعال دون الإضرار بالمحاصيل. وفي الوقت نفسه، نظرًا لأن IPTG هو نوع جديد من المبيدات الحيوية، فإنه يتميز بملاءمة أفضل للبيئة وسلامة أعلى للإنسان والحيوان مقارنة بالمبيدات الحشرية الكيميائية التقليدية. لذلك، لدى IPTG آفاق تطبيق واسعة في التطبيقات الزراعية.

التدخل المحتمل في تنظيم التعبير الجيني

 

تحريض غير محدد

IPTG، باعتباره محفزًا، لديه خصوصية معينة في عمله، ولكن قد يحدث تحريض غير محدد-في بعض الحالات. لا يحفز IPTG التعبير عن الجينات المستهدفة فحسب، بل قد يؤثر أيضًا على التعبير عن الجينات الأخرى داخل الخلايا. قد يكون هذا بسبب حقيقة أنه بعد أن يرتبط IPTG بالبروتين الكابح، فإنه يغير شكل ووظيفة البروتين الكابح، مما يتسبب في أن يكون له تأثيرات معينة على المشغلات الأخرى، وبالتالي تخفيف تثبيط التعبير الجيني غير المستهدف.

يمكن أن يؤدي التحريض غير المحدد إلى تغييرات في ملامح التعبير البروتيني داخل الخلايا، مما ينتج بروتينات غير متوقعة لا تتداخل فقط مع التحليل والحكم على النتائج التجريبية، ولكن قد يكون لها أيضًا آثار ضارة على الوظائف الفسيولوجية الطبيعية للخلايا. على سبيل المثال، في بعض تجارب التعبير البروتيني، بعد الحث باستخدام IPTG، بالإضافة إلى اكتشاف زيادة في التعبير عن البروتين المستهدف، تم العثور أيضًا على تنظيم للتعبير عن بعض البروتينات الأخرى غير المعروفة. قد تتداخل هذه البروتينات المعبرة غير المحددة - مع التنقية والدراسات الوظيفية للبروتين المستهدف.

عدم رجعة التعبير المستحث

في الظروف العادية، بعد إزالة المحفز، يجب أن يعود التعبير الجيني إلى مستوى ما قبل التحريض. ومع ذلك، فقد أظهرت الدراسات أن التعبير الجيني الناجم عن IPTG قد يكون له درجة معينة من اللارجعة. بمجرد استخدام IPTG للحث على التعبير الجيني، حتى إذا تمت إزالة IPTG، قد يظل مستوى التعبير الجيني عند مستوى عالٍ ولا يمكن استعادته إلى مستوى خط الأساس قبل الحث.

قد تكون هذه اللارجعة نتيجة للتغيرات طويلة المدى داخل الخلايا التي يسببها IPTG، مثل التغييرات في بنية الكروماتين وتعديلات عوامل النسخ، والتي تحافظ على مستوى عالٍ من نشاط نسخ الجينات. يمكن أن يسبب عدم رجعة التعبير المستحث صعوبات كبيرة في التجارب، خاصة في التجارب التي تتطلب تنظيمًا دقيقًا لمستويات التعبير الجيني، مما قد يؤدي إلى نتائج تجريبية غير دقيقة وغير قابلة للتكرار.

استناداً إلى تركيبته الجزيئية المستقرة ونشاطه المحفز الموثوق، أصبح IPTG كاشفاً لا غنى عنه في مختبرات البيولوجيا الجزيئية في جميع أنحاء العالم. ويستخدم على نطاق واسع في التعبير البروتيني المؤتلف، وأبحاث وظائف الجينات، وتجارب الهندسة الميكروبية، مما يوفر تأثيرات تحريضية مستقرة للبحث العلمي والإنتاج الصناعي. إن تركيزنا على المدى الطويل- على تكنولوجيا التخليق العضوي ومراقبة الجودة الصارمة يضمن أن منتجات IPTG لدينا تحافظ على درجة عالية من النقاء والاستقرار والاتساق، وتلبي بشكل فعال المتطلبات المطلوبة للتجارب العلمية والتطبيقات الصناعية.

بدعم من فريق البحث والتطوير المحترف، نواصل تحسين عمليات التوليف وتحسين أداء المنتج لتقديم خدمة أفضل للباحثين والمصنعين العالميين. بفضل آلية عمله الواضحة وخصائصه المستقرة وقابلية تطبيقه على نطاق واسع، سيظل IPTG بمثابة كاشف أساسي في أبحاث علوم الحياة، وسنستمر في تقديم منتجات عالية الجودة- ودعم فني احترافي لتطوير التكنولوجيا الحيوية.

الوسم : كاشف iptg cas 367-93-1، الموردين، الشركات المصنعة، مصنع، بالجملة، شراء، السعر، بالجملة، للبيع