مسحوق Liraglutide CAS 204656-20-2

مسحوق Liraglutide، الصيغة الجزيئية C172H265N43O51 ، CAS 204656-20-2 ، الوزن الجزيئي 1209.40. إنه جلوكاجون بشري مُصلح بشكل مصطنع مثل الببتيد -1 (GLP-1) مع أكثر من 97 ٪ من التشابه في تسلسل GLP-1 الطبيعي. يمكن أن يذوب في الماء والإيثانول والبروبيلين جليكول. يتم استبدال موضع ليسين 34 من جزيء GLP-1 الطبيعي بالأرجينين ، والذي لا يحافظ فقط على وقت الربط بين منتجات الأسيلة والبروتينات ، ولكنه أيضًا يتغلب بشكل كبير على عيب GLP السهل. في ظل ظروف التخزين العادية ، فإنه يظهر استقرارًا جيدًا ، ويمكن أن يحافظ حله المائي على الاستقرار الفيزيائي والكيميائي لمدة عامين على الأقل.

السمية الوراثية: نتائج اختبار AMESمسحوق Liraglutide، كان اختبار الانحراف الكروموسومات للخلايا اللمفاوية الدمية المحيطية البشرية ، واختبار النوى الدقيقة الفئران سلبية.

السمية الإنجابية:

1. تم حقن الفئران الذكور تحت الجلد مع 0.1 و 0.25 و 1.0mg/kg/d من liraglutide قبل 4 أسابيع قبل التزاوج وأثناء التزاوج. بجرعة 1.0mg/kg/d ، لم تتأثر خصوبة الحيوانات الذكور بشكل مباشر. وفقًا لحسابات البلازما AUC ، كان التعرض الجهازي الناتج عن هذه الجرعة حوالي 11 ضعفًا للتعرض البشري في الحد الأقصى للجرعة البشرية الموصى بها (MRHD). أدى الحقن تحت الجلد البالغ 1.0 ملغ/كغ في الفئران الإناث إلى زيادة الوفاة الجنينية المبكرة ، وزيادة الوزن المرئية ، وانخفاض تناول الطعام.

2. من 2 أسابيع قبل التزاوج إلى اليوم السابع عشر من الحمل في الفئران الإناث ، كانت تدار الحقن تحت الجلد من 0.1 ، 0.25 ، و 1.0 ملغ/كغ/د من liraglutide. وفقًا لحسابات البلازما AUC ، كان التعرض الجهازي الناتج عن هذه الجرعات الثلاث حوالي 0.8 و 3 و 11 أضعاف التعرض البشري بموجب MRHD ، على التوالي. في مجموعة الجرعة 1mg/kg/d ، كانت هناك زيادة طفيفة في عدد الوفيات الجنينية المبكرة. في جميع الجرعات ، لوحظت تشوهات الجنين ، والتغيرات الكلوية والأوعية الدموية ، والتحجر غير المنتظم للجمجمة ، وحالة كاملة من التحجر المفرط. بجرعة 1.0mg/kg/d ، لوحظت الكبد المرقط والتواء الضلع الطفيف. إن حدوث التشوهات الجنينية التي تتجاوز الفترة نفسها والتحكم التاريخي هي: التشوهات البلعومية و/أو تضيق عند فتح الحلق بجرعة 01mg/kg/d ، والعيوب السرية عند جرعات 0.1 و 0.25 ملغ/د.

في اليوم السادس إلى الثامن عشر من الحمل ، تم حقن الأرانب تحت الجلد مع liraglutide بتركيزات 0.01 ، 0.025 ، و 0.05mg/kg/d. وفقًا لحسابات البلازما AUC ، كان التعرض المنهجي للأرانب الحوامل أقل من التعرض للبشر خلال MRHD. في جميع الجرعات ، انخفض وزن الجنين وزادت حدوث تشوهات الجنين الشديدة بطريقة تعتمد على الجرعة. عند جرعات 0.01mg/kg/d (عظام الكلى والكتف والطحال) ، أكبر من أو تساوي 0.01mg/kg/d (عيون و forelimbs) ، 0.025mg/kg/d (الدماغ ، الذيل والفقرات ، والأوعية الدموية الكبيرة والقلب ، الحبل السري) ، أكبر من 0.025mg/kg/d ( 0.05mg/kg/d (العظم الجداري والأوعية الدموية الكبيرة) ، تجاوزت حالات التشوهات الضوابط المعاصرة والتاريخية. تم العثور على تحجر غير منتظم و/أو تشوهات الهيكل العظمي في الجمجمة والطوق ، والفقرات والأضلاع ، والقص ، والحوض ، والعظام العصع والكتف والطحال. هناك أيضًا تباين هيكلي تعتمد على الجرعة الطفيفة. تم العثور على تشوهات الحشوية في الأوعية الدموية والرئتين والكبد والمريء. أظهرت جميع مجموعات العلاج فصوص مزدوجة أو تشعبات من المرارة ، ولكن لم يلاحظ أي موقف مماثل في المجموعة الضابطة.

4. خلال الفترة من اليوم 6 من الحمل إلى الفطام أو إنهاء الرضاعة في اليوم 24 ، تم حقن الفئران الإناث تحت الجلد مع 0.1 ، 0.25 ، و 1.0 ملغ/كغ/د من liraglutide. وفقًا لحسابات البلازما AUC ، كان التعرض المنهجي حوالي 0.8 و 3 و 11 ضعف التعرض البشري خلال MRHD. تأخرت فترة توصيل معظم الحيوانات في مجموعة العلاج قليلاً. كان متوسط ​​وزن الأطفال حديثي الولادة في مجموعة العلاج أقل من تلك الموجودة في المجموعة الضابطة. أظهرت الفئران الإناث في مجموعة الجرعة 1.0mg/kg/d فقدان الدم وسلوك الإثارة أثناء الولادة. كان متوسط ​​وزن الجسم للفئران النسل F2 في مجموعة العلاج منذ الولادة وحتى اليوم الرابع عشر بعد الولادة أقل من المجموعة الضابطة ، لكن الاختلافات بين المجموعات لم تصل إلى الأهمية الإحصائية.

مسحوق Liraglutideهو التناظرية البشرية المتراكمة بشكل مصطنع مثل الببتيد -1 (GLP-1) مع أكثر من 97 ٪ تشابه تسلسل مقارنة مع GLP-1 الطبيعي. يتضمن التركيب الجزيئي لل liraglutide الخصائص الرئيسية التالية: يتم استبدال الموضع 34 ليسين لجزيء GLP-1 الطبيعي بالأرجينين ، والذي لا يحافظ فقط على وقت الربط بين منتجات الالتزام والبروتينات ، ولكنه يتغلب أيضًا على عيب GLP Easy Scredation ؛ تمت إضافة سلسلة جانبية للأحماض الدهنية الإضافية إلى ليسين 26 ، مما يساعد على إطالة عمر النصف لمنتجات الأسيلة في الجسم الحي. هذه التغييرات الجزيئية الفريدة جعلت delilaglutide تظهر تأثيرات رائعة في العلاج السريري ، وخاصة في مرض السكري وفقدان الوزن.

تتضمن الطرق الكيميائية لتجميع liraglutide بشكل أساسي الخطوات التالية:

1. توليف الشظية

أولاً ، قسّم Liraglutide بأكمله إلى عدة مقاطع ، والتي يمكن تقسيمها عمومًا إلى خمسة قطاعات: الأحماض الأمينية الأولى إلى الرابعة ، والأحماض الأمينية من الخامسة إلى العاشرة ، والأحماض الأمينية من 11 إلى 16 ، والأحماض الأمينية من 17 إلى 24 ، والأحماض الأمينية من 25 إلى 31. يتم تصنيع كل جزء بشكل منفصل ، مما قد يقلل من صعوبة وتكلفة تخليق الببتيد وتحسين كفاءة التوليف.

بالنسبة لتوليف كل جزء ، يتم استخدام تخليق المرحلة الصلبة أو طرق تخليق الطور السائل بشكل عام. تتضمن طريقة تخليق المرحلة الصلبة توصيل مجموعات الكربوكسيل من الأحماض الأمينية بالراتنج ، ثم إضافة الأحماض الأمينية بالتسلسل إلى الراتنج بالتسلسل ، وأخيراً قطع الببتيدات من الراتنج. تتضمن طريقة تخليق المرحلة السائلة إذابة جميع الأحماض الأمينية في مذيب عضوي ثم تكثيفها بالتسلسل لتشكيل شظايا الببتيد.

2. رد فعل اقتران

قم بإجراء تفاعل اقتران على شظايا الببتيد 5 التي تم تصنيعها في الخطوة 1 لتشكيل liraglutide كاملة. يمكن تنفيذ تفاعل الاقتران باستخدام عوامل الاقتران الكيميائية أو البيولوجية ، ويمكن اختيار الطريقة المحددة وفقًا للاحتياجات الفعلية.

في تفاعل الاقتران ، من الضروري توصيل المجموعة الأمينية لكل جزء بمجموعة الكربوكسيل من الجزء التالي. لتحقيق ذلك ، عادة ما يكون من الضروري استخدام عوامل التكثيف مثل DIC أو BOP. يمكن لعوامل التكثيف هذه تعزيز التفاعل بين مجموعات الأمينية والكربوكسيل ، وتشكيل روابط الببتيد. في تفاعل الاقتران ، ينبغي أيضًا إيلاء الاهتمام للتحكم في ظروف التفاعل ، مثل درجة الحرارة ، وقيمة الرقم الهيدروجيني ، ووقت التفاعل ، لضمان التقدم السلس للتفاعل.

3. التنقية والتعريف

يجب تنقية وتحديد Liraglutide المصنفة لضمان نقاء وجودة المنتج. عادة ما يتم تنقية باستخدام طرق مثل كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) أو الكهربائي ، تليها التعريف باستخدام مطياف الكتلة ، والرنين المغناطيسي النووي ، وطرق أخرى. من خلال هذه الوسائل ، يمكن التأكد من أن الوزن الجزيئي وتسلسل المنتج المصنوع يتسق مع التوقعات ، ولا توجد شوائب أو بقايا المنتجات الثانوية.

4. التعديلات الأخرى

بالإضافة إلى الخطوات المذكورة أعلاه ، تكون هناك حاجة في بعض الأحيان التعديلات الأخرى ، مثل إضافة أو إزالة مجموعات الحماية. هذه الخطوات ضرورية أيضًا لأنها يمكنها حماية المجموعات النشطة في الببتيدات من حدوث تفاعلات جانبية أو حدوث جودة وعائد المصنفةمسحوق Liraglutide.

ما سبق هو الطرق الكيميائية الرئيسية لتوليف Liraglutide ، ولكن بالطبع ، يجب ملاحظة بعض التفاصيل والتقنيات في التشغيل العملي. على سبيل المثال ، يمكن أن يؤثر اختيار نظام المذيبات المناسب ، والتحكم في درجة الحرارة ودرجة الحموضة ، واستخدام المحفزات المناسبة ، على كفاءة التوليف وجودة المنتج. لذلك ، في التشغيل العملي ، يجب إجراء التعديلات والتحسينات وفقًا لظروف محددة.

يلعب Liraglutide (ناهض مستقبلات GLP-1 طويل المفعول) دورًا مهمًا في علاج مرض السكري. لضمان قابلية التحكم في الجودة ، من الضروري إنشاء طرق تحليلية علمية وصارمة ، وإجراء التحقق المنهجي لضمان موثوقية هذه الأساليب. يتم إجراء التحليل التالي من ثلاثة جوانب: عناصر التحقق من الصحة وطرق التحقق من الصحة ونقاط التحكم الرئيسية.

عناصر التحقق الأساسية والمتطلبات التقنية

خصوصية

الهدف: لإثبات أن الطريقة يمكن أن تميز Liraglutide عن الشوائب ومنتجات التدهور والسواغ.

استراتيجية التنفيذ:

الكروماتوغرافيا: استخدم HPLC-UV أو UPLC-MS. من خلال اختبارات التحلل القسري (مثل ارتفاع درجة الحرارة ، التعرض للضوء ، التحلل المائي الحمضي) ، يولد منتجات التدهور والتحقق من درجة الفصل بين الذروة الرئيسية وذروة الشوائب (أكبر من أو تساوي 1.5). على سبيل المثال ، في دراسة نموذج APOE-/- الفأر ، بعد أكسدة Liraglutide ، تحتاج إلى تأكيد منتجات التحلل (مثل adducts لأحماض الأحماض الفورمية) عن طريق التحليل الكروماتوغرافي لضمان تأثير فصل منتجات التحلل من الذروة الرئيسية.

التحليل الطيفي: استخدم كاشف PDA لمقارنة أطياف الأشعة فوق البنفسجية للذروة الرئيسية والشوائب ، وتأكيد نقاء القمم.

التحكم الفارغ: تحقق من عدم وجود إشارات إيجابية خاطئة باستخدام عينات بدون liraglutide (مثل حلول السواغ).

 

دقة

الهدف: لضمان أن تكون النتائج المقاسة قريبة من القيمة الحقيقية ويتم التحكم في معدل الاسترداد ضمن 98 ٪ - 102 ٪.

استراتيجية التنفيذ:

اختبار استرداد الإضافة القياسي: أضف كمية معروفة من المادة المرجعية إلى عينة مع محتوى Liraglutide المعروف وقياس معدل الاسترداد. على سبيل المثال ، في تحليل الصيغة ، أضف 0.5 ملغ/مل ، 1.0 ملغ/مل ، و 1.5 ملغ/مل من liraglutide إلى محلول السواغ الفارغ ، كرر كل تركيز 3 مرات ، وحساب معدل الاسترداد المتوسط.

طريقة المقارنة: مقارنة بالطرق الكلاسيكية (مثل المعايرة) أو الأساليب التي تم التحقق منها (مثل طرق الأدوية) ، وينبغي أن يكون انحراف النتيجة أقل من أو يساوي 2 ٪.

 

دقة

الهدف: لتقييم درجة تقارب نتائج القياس المتكررة ، مع RSD أقل من أو تساوي 2 ٪.

استراتيجية التنفيذ:

التكرار: قم بإجراء 6 قياسات متتالية لنفس العينة من قبل نفس المحلل ، نفس الأداة ، ونفس الدفعة من العينات ، وحساب RSD.

الدقة الوسيطة: احسب RSD من خلال تحديد نفس الدفعة من العينات من قبل المحللين المختلفين ، والأدوات المختلفة ، وتواريخ مختلفة. على سبيل المثال ، في تحديد محتوى Liraglutide ، يجب أن يكون التكرار RSD أقل من أو يساوي 1.5 ٪ ، ويجب أن تكون الدقة المتوسطة RSD أقل من أو تساوي 2.0 ٪.

استنساخ: التحقق التعاوني من قبل مختبرات متعددة (مثل الأساليب القياسية Pharmacopoeia) ، يجب على RSD الامتثال لمبادئ التوجيه.

 

حد الكشف وحد ​​الكمي

الهدف: لتحديد الحد الأدنى للتركيز الذي يمكن للطريقة اكتشافه وقياس liraglutide.

استراتيجية التنفيذ:

طريقة نسبة الإشارة إلى الضوضاء: حدد LOD بنسبة إشارة إلى ضوضاء 3: 1 ، وحدد LOQ بنسبة إشارة إلى الضوضاء 10: 1. على سبيل المثال ، في طريقة HPLC-UV ، يمكن أن يكون LOD of Liraglutide منخفضًا إلى 0.01 ميكروغرام/مل ، و LOQ هو 0.05 ميكروغرام/مل.

طريقة المنحنى القياسي: حساب LOD و LOQ باستخدام إشارات الاستجابة للمواد القياسية للركن المنخفض (مثل 0.1 ميكروغرام/مل - 1 ug/ml).

 

الخطي

الهدف: لإثبات أن إشارة الاستجابة تتناسب مع التركيز ، مع R² أكبر من أو تساوي 0.999.

استراتيجية التنفيذ:

اختبار تركيز التدرج: قم بإعداد 5-7 تدرجات تركيز (مثل 0.1 ملغ/مل - 2.0 ملغ/مل) من الحلول القياسية ، وقياس مساحة الذروة أو قيمة الاستجابة ، ورسم المنحنى القياسي.

التحليل المتبقي: تحقق مما إذا تم توزيع المتبقيات بشكل عشوائي وليس هناك انحراف منهجي.

 

يتراوح

الهدف: لتحديد نطاق التركيز القابل للتطبيق للطريقة ، عادة 120 ٪ من LOQ إلى الحد الأعلى للخطي.

استراتيجية التنفيذ:

تحديد المحتوى: يتم تعيين النطاق بنسبة 80 ٪ - 120 ٪ من المبلغ المسمى. على سبيل المثال ، يجب أن يكون نطاق تحديد المحتوى لصياغة Liraglutide 0.4 ملغ/مل - 1.2 ملغ/مل. التحكم في الشوائب: وفقًا للمبدأ التوجيهي لـ ICH Q3D ، حدد نطاق الحد من الشوائب (على سبيل المثال ، شوائب واحدة أقل من أو تساوي 0.5 ٪ ، إجمالي الشوائب أقل من أو تساوي 2.0 ٪).

وثائق التحقق من الصحة وإدارة البيانات

01

خطة التحقق من الصحة وتقريرها

حدد بوضوح عناصر التحقق من الصحة ، والأساليب ، ومعايير القبول ، وإجراءات المناولة غير الطبيعية. على سبيل المثال ، إذا تجاوزت الدقة RSD الحد ، فمن الضروري التحقيق في أخطاء الأدوات أو الأخطاء التشغيلية.

قم بتسجيل البيانات الأصلية (مثل الكروماتوجرام ، والمنحنيات القياسية ، وجداول حساب معدل الاسترداد) لضمان التتبع.

02

تطوير طريقة إشارة الاستقرار

لاختبارات التحلل الإلزامي ، يجب أن يغطي الأكسدة ، والتعرض للضوء ، والتحلل ، وما إلى ذلك ، لمحاكاة ظروف التخزين الفعلية. على سبيل المثال ، تم وضع Liraglutide في 60 درجة لمدة 48 ساعة ، يجب أن يكون معدل التحلل أكبر من أو يساوي 10 ٪ للتحقق من قدرة الطريقة على اكتشاف منتجات التحلل.

03

الامتثال التنظيمي

اتبع ICH Q2 (R2) ، USP<1225>، وإرشادات GMP الصينية لضمان أن عناصر التحقق من الصحة تغطي المؤشرات الأساسية مثل الخصوصية والدقة.

لتحليل الشوائب عنصري ، يجب أن يتوافق مع ICH Q3D و USP<233>المتطلبات ، والتحكم في حدود العناصر من فئة 1 مثل CD ، و PB.

الوسم : Liraglutide Powder CAS 204656-20-2 ، الموردين ، المصنعين ، المصنع ، الجملة ، شراء ، السعر ، الجزء الأكبر ، للبيع