4-ميثيلومبيليفيريل-بيتا-د-جلوكورونيد(4-MUG) هو مركب عضوي له الصيغة الجزيئية C16H13NO7 وكتلة مولية قدرها 333.27 جم/مول لـ CAS 6160-80-1. وعادة ما يظهر على شكل مسحوق أبيض إلى أصفر فاتح أو كريستال. لديه قابلية جيدة للذوبان في الماء ويمكن أن يذوب في الماء. يحتوي التركيب الجزيئي لهذا المركب على مجموعة حمض الجلوكورونيك (GlcA) ومجموعة 4- ميثيلومبيليفيرون (4-MeUmb). ترتبط مجموعة حمض الجلوكورونيك بمجموعة 4-ميثيلومبيليفيرون من خلال روابط جليكوسيدية. الخصائص الطيفية المميزة. على سبيل المثال، تحت الضوء فوق البنفسجي، يُظهر المركب مضانًا قويًا ويمكن استخدامه في التحليل الكمي. الحد الأقصى لطول موجة الإثارة والحد الأقصى لطول موجة الانبعاث هو 365 نانومتر و448 نانومتر، على التوالي. وهو حمض ضعيف مع قيمة pKa أقل في الماء. باعتباره ركيزة ذات خصائص الفلورسنت، فإن له قيمة تطبيقية واسعة في الكشف عن نشاط الإنزيم وفحصه. إن مبدأها البسيط وتشغيلها المريح وحساسيتها العالية وقابليتها للقياس الكمي يجعلها أداة مهمة في مجالات متعددة مثل العلوم الطبية الحيوية والكيميائية والبيولوجية.
|
|
|
|
صيغة كيميائية |
C16H16O9 |
|
الكتلة الدقيقة |
352 |
|
الوزن الجزيئي الغرامي |
352 |
|
m/z |
352 (100.0%), 353 (17.3%), 354 (1.8%), 354 (1.4%) |
|
تحليل العناصر |
C, 54.55; H, 4.58; O, 40.87 |
4-ميثيلومبيليفيريل-بيتا-د-جلوكورونيد(4-MUG) عبارة عن ركيزة فلورسنت تستخدم على نطاق واسع للكشف عن نشاط الإنزيم وفحصه.
1. الكشف عن نشاط الإنزيم
المبدأ: يعتمد اكتشاف نشاط الإنزيم لـ 4-MUG على خصائصه المتمثلة في التحلل المائي بواسطة إنزيمات معينة كركيزة. عندما يعمل الإنزيم على 4-MUG، فإنه يشق روابطه الجليكوسيدية، ويطلق 4-ميثيلومبيليفيرون (4-MU) بخصائص الفلورسنت. من خلال الكشف عن شدة وتغيرات إشارات الفلورسنت، يمكن تقييم نشاط الإنزيمات.
مجال التطبيق:
(1) تحليل العينات البيولوجية: باستخدام 4-MUG كركيزة، يمكن اكتشاف نشاط إنزيمات معينة في العينات البيولوجية (مثل الدم والبول وجناس الأنسجة وما إلى ذلك). وهذا له أهمية كبيرة لتشخيص الأمراض، وأبحاث استقلاب الدواء، واكتشاف العلامات الحيوية.
(2) فحص مثبطات الإنزيم: من خلال احتضان 4- MUG مع مثبطات الإنزيم، يمكن ملاحظة تأثير مثبطات الإنزيم على نشاط الإنزيم. يمكن استخدام هذه الطريقة لفحص وتقييم فعالية مثبطات الإنزيم، وتوفير التوجيه لتصميم الأدوية وتطويرها.
(3) بحث حركية الإنزيم: باستخدام تركيزات مختلفة من 4-MUG كركائز، يمكن دراسة المعلمات الحركية للإنزيم، مثل ثابت ميكايليس (Km) ومعدل التفاعل الأقصى (Vmax). تساعد هذه البيانات على فهم آلية وكفاءة التفاعلات المحفزة بالإنزيم.
2. فحص نشاط الانزيم
(1) الفحص عالي الإنتاجية: 4-MUG مناسب لفحص نشاط الإنزيم عالي الإنتاجية لأنه يتمتع بخصائص مضان ويمكنه تحقيق اكتشاف سريع وحساس. من خلال احتضان عدد كبير من المركبات المرشحة باستخدام 4-MUG، يمكن فحص المركبات ذات تنظيم نشاط الإنزيم.
(2) فحص مثبط الإنزيم: باستخدام 4-MUG كركيزة، يمكن فحص المركبات ذات التأثيرات المثبطة للإنزيم. يمكن استخدام هذه الطريقة لاكتشاف مثبطات إنزيمية جديدة وتوفير جزيئات مرشحة لتصميم الأدوية وتطويرها.
(3) فحص منشط الإنزيم: بالإضافة إلى مثبطات الإنزيم، يمكن أيضًا استخدام 4-MUG لفحص المركبات ذات تأثيرات تنشيط الإنزيم. ومن خلال الكشف عن تعزيز إشارات التألق، يمكن تحديد المركبات التي يمكن أن تعزز نشاط الإنزيم، مما يوفر مسارات جديدة لتنظيم وظيفة الإنزيم.
3. وضع علامات التألق الحيوي: 4-ميثيللومبيليفيرول-بيتا-د-جلوكورونيد له خصائص تألق وغالبًا ما يستخدم كعلامة تألق حيوي. يمكن أن ينبعث منها مضان أزرق ساطع تحت إثارة الضوء فوق البنفسجي، ويتداخل طيف الانبعاث بشكل كبير مع طيف الإثارة، وهو مفيد للكشف عن الفلورة وتحليلها. يمكن تصنيع مجسات الفلورسنت عن طريق ربط 4-ميثيللومبيليفيرول-بيتا-د-جلوكورونيد مع الأجسام المضادة أو البروتينات أو الجزيئات الحيوية الأخرى، والتي يمكن استخدامها للكشف الحساس وتوطين الجزيئات المستهدفة في العينات البيولوجية.
4. أبحاث استقلاب الدواء:4-ميثيلومبيليفيريل-بيتا-د-جلوكورونيدغالبًا ما يستخدم كمركب نموذجي لأبحاث استقلاب الدواء. في أبحاث استقلاب الدواء، يمكن لهذا المركب محاكاة بنية المستقلبات الطبيعية ويكون بمثابة نموذج للمنتجات الوسيطة أو النهائية المحتملة التي قد يتم إنتاجها أثناء استقلاب الدواء. من خلال دراسة وتوصيف العمليات الأيضية للأدوية في الكائنات الحية، يمكننا الحصول على فهم أعمق لمساراتها الأيضية، وحركيتها، وتوافرها البيولوجي.
طريقة التوليف المختبري4-ميثيلومبيليفيريل-بيتا-د-جلوكورونيديتضمن الخطوات التالية:
(1) إدخال مجموعات الحماية: حدد مجموعات الحماية المناسبة لحماية حمض الجلوكورونيك وتجنب التفاعلات الجانبية غير الضرورية في التفاعلات اللاحقة. تشمل مجموعات الحماية الشائعة مجموعات الإستر، ومجموعات الأثير، وما إلى ذلك. اختر إستر الميثيل كمجموعة وقائية لتحويل حمض الجلوكورونيك إلى حمض الجلوكورونيك إستر الميثيل. يستخدم هذا التفاعل الميثانول وأنهيدريد الكربوكسيل كمواد متفاعلة، مع حمض الكبريتيك كمحفز.
معادلة التفاعل هي كما يلي:
(الفصل3)2C(OH)-CH2-كوه + ح2لذا4→ (الفصل3)2C(O)-CH2-COOH ٪ 2b CH3أوه
(2) تفاعل الاقتران: تفاعل الاقتران بين 4-ميثيلومبيليفيرون وحمض الجلوكورونيك مع مجموعات الحماية. تتطلب هذه الخطوة عادة استخدام عوامل التوصيل مثل DCC، EDC، وما إلى ذلك لتسهيل التفاعل. يجب التحكم في ظروف التفاعل بشكل مناسب لضمان نقاء المنتج وإنتاجيته. يستخدم هذا التفاعل DCC كعامل اقتران،
(3) معادلة التفاعل هي كما يلي:
(الفصل3)2C(O)-CH2-COOH ٪ 2b NH2-CH٪7b٪7b1٪7d٪7dCH-COOH ٪2b DCC ٪2b C6H5N3يا → (CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH٪7b٪7b3٪7d٪7dCH-COOH ٪2B H2يا + نه4أوه
(الفصل3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH=CH-COOH + NH2(الفصل3) → (الفصل3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH٪7B٪7B3٪7D٪7DCH-CO-NH(CH3) + H2O
(الفصل3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH٪7B٪7B3٪7D٪7DCH-CO-NH(CH3) + هاربور → (CH3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH٪7B٪7B3٪7D٪7dCH-CO-Br(CH3) + هاربور
(الفصل3)2C(O)-CH2-CO-NH-CH٪7B٪7B3٪7D٪7dCH-CO-Br(CH3) → (الفصل3)2C(O)-CH2-CO٪5bC16H8-(ن.ح-)٪7b٪7b0٪7d٪7d٪5d-Br(CH3) + كلوريد الصوديوم + NaBr
(3) إزالة المجموعات الواقية: باستخدام خليط من ميثانول الصوديوم وإيثانول الصوديوم كمحفز، تتم إزالة إستر ميثيل حمض ميثيل جلوكورونيك من 4-Methyllumbelliferyl beta D-glucuronide. معادلة التفاعل هي كما يلي:
(الفصل3)2C(O)-CH2-CO٪5bC16H8-(ن.ح-)٪7b٪7b0٪7d٪7d٪5d-Br(CH3) + الفصل3أونا + ج2H5أونا → (CH3)2C(O)-CH2-CO٪5bC16H8-(ن.ح-)٪7b٪7b0٪7d٪7d٪5d ٪7b٪7b1٪7d٪7dNaBr ٪7b٪7b2٪7d٪7dCH3أوه + ج2H5أوه
(4) التنقية: تتم تنقية المنتج الخام عن طريق الفصل الكروماتوجرافي العمودي وإعادة البلورة للحصول على درجة نقاء عالية 4- ميثيللومبيليفيرول-بيتا-د-جلوكورونيد. العملية المحددة هي كما يلي:
قم بإذابة المنتج الخام في كمية مناسبة من المذيب وفصله بواسطة كروماتوجرافيا العمود. حدد المواد الممتزة والسائلة المناسبة، واغسل الشوائب والمواد الخام غير المتفاعلة بالتسلسل للحصول على منتجات نقية. إعادة البلورة هي عملية إذابة المنتجات النقية في كمية مناسبة من المذيب والحصول على منتجات نقية عن طريق التبريد والبلورة. يمكن لإعادة البلورة إزالة كمية صغيرة من المواد الخام والمنتجات الثانوية غير المتفاعلة، مما يزيد من نقاء المنتج.
الوسم : 4-ميثيلومبيليفيريل-بيتا-د-جلوكورونيد كاس 6160-80-1، موردون، مصنعون، مصنع، بيع بالجملة، شراء، سعر، بالجملة، للبيع