3xflag الببتيدهو تسلسل علامة الببتيد المهمة المستخدمة على نطاق واسع في عمليات التعبير البروتين وتنقية في البحوث الطبية الحيوية. الصيغة الجزيئية C120H169N31O49S ، CAS 402750-12-3. يتكون من 23 من الأحماض الأمينية ، ويحتوي تسلسله على ثلاثة أشكال متكررة من ASP Tyr XAA XAA ASP ، والتي تمنحها ميزات هيكلية محددة. لديه ذوبان جيد في مذيبات محددة. على سبيل المثال ، في DMSO ، قابليتها للذوبان عالية ، مما يجعلها مريحة للعمليات والتجارب في الحل. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يحقق أيضًا تأثير حل جيد في الماء من خلال التسخين المعتدل. كما أن لديها بعض الخصائص الخاصة. على سبيل المثال ، يحتوي على مستضد جيد وتفاعلية ، ويمكن أن يرتبط بأجسام مضادة لمكافحة العلم المحددة. هذه القدرة الملزمة تجعلها قابلة للتطبيق على نطاق واسع في تجارب مثل المناعة. من خلال الارتباط التنافسي للأجسام المضادة للمضادات العليا ، يمكن تعبير اندماج العلم عن البروتين الذي يرتبط بالأجسام المضادة للعلم أثناء الترسيب المناعي ، وبالتالي تحقيق التوطين والاكتشاف وتنقية البروتين المستهدف.
|
أغطية الزجاجة المخصصة والفلين:
|
|
|
صيغة كيميائية |
C120H169N31O49S |
|
كتلة دقيقة |
2860 |
|
الوزن الجزيئي |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
تحليل عنصري |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
3xflag الببتيدهي علامة تستخدم في أبحاث البروتين ، تتكون من 8 أحماض أمينية مع تسلسل dykdhdgdykdhdidykdddk. وظيفتها الرئيسية هي أن تكون بمثابة علامة لتعبير البروتين وتنقية ، وتوفير وسائل مريحة وفعالة في البحث.
1. تنقية التقارب:
يمكن استخدامه كملصق لتنقية البروتين ، ومن خلال تقاربه العالي مع الأجسام المضادة المضادة للعلم ، يمكن تنقية البروتين المستهدف بسهولة. عادةً ما يتم نقل البروتين المستهدف إلى خلايا ذات متجه تعبير يحتوي على الببتيد 3x من العلم ، ثم يتم تنقيته بواسطة التقارب باستخدام الأجسام المضادة للعلم للحصول على بروتين مستهدف عالي نقاء بسرعة وكفاءة.
2. الاختبار المناعي:
بسبب ارتفاع المناعة ، يمكن استخدامه للكشف عن تعبير البروتين والتوطين. من خلال استخدام الأجسام المضادة لمكافحة العلم المحددة ، يمكن إجراء التقنيات التجريبية مثل التصلب المناعي وتلطيخ المناعي لاكتشاف مستوى التعبير وتوزيع البروتينات المستهدفة بسرعة وبدقة.
3. ترشيح استنساخ:
يمكن أيضًا استخدامه لراحة فحص استنساخ البروتين. في عملية بناء ناقلات تعبير البروتين ، توصيل تسلسل الجينات للبروتين المستهدف مع3xflag الببتيديمكن أن يسهل التسلسل فحص الحيوانات المستنسخة الإيجابية مع البروتين المستهدف من خلال الكشف عن المناعة وطرق أخرى ، وبالتالي تسريع عملية أبحاث وظائف البروتين.
4. المناعة:
يمكن أيضًا استخدامه لتجارب الهطول المناعي للبروتين. عن طريق ربط البروتينات التي تحتوي على علامات الببتيد 3x من العلم للأجسام المضادة للعلم ، ثم استخدام مواد الامتزاز مثل البروتين A/G الخرزات المغناطيسية ، يمكن أن يترسب البروتين المستهدف وشركائه المتفاعلون بشكل انتقائي من مستخلصات الخلايا لدراسة شبكة تفاعل البروتين.
5. فحص المخدرات:
يمكن أيضًا استخدامه في أبحاث فحص المخدرات. من خلال الجمع بين علامة الببتيد 3X مع بروتين الاهتمام ، يمكن تحقيق فحص عالي الإنتاجية للبروتين. يمكن استخدام طريقة الفحص هذه لاكتشاف أهداف جديدة للمخدرات وتقييم تفاعلات بروتين الدواء وما إلى ذلك.
6. أبحاث وظائف البروتين:
لا يؤثر إدخال الملصقات بشكل كبير على التركيب الطبيعي للبروتينات ووظيفة البروتينات ، وبالتالي يمكن استخدامها لدراسة الوظائف البيولوجية ، والتوطين الخلوي ، والتفاعلات ، ونقل الإشارة للبروتينات. من خلال إدخال علامة الببتيد 3x Flag ، يمكن إجراء البحوث المتعمقة على الخصائص البيولوجية للبروتينات ، مما يساعد على الكشف عن آليات عملهم في علم الأحياء الخلوي وعلم وظائف الأعضاء.
3xflag الببتيدهو الببتيد الذي يحتوي على 8 أحماض أمينية ، مع تسلسل dykdhdgdykdhdidykdddk. يتم استخدامه بشكل شائع كعلامة بروتين لتنقية واكتشاف والبحث عن البروتينات المستهدفة. في عملية التخليق الحيوي ، يمكن تحضيره من خلال التوليف الكيميائي أو طرق الهندسة الوراثية. فيما يلي الخطوات التفصيلية لطرق الهندسة الوراثية:
1. تصميم الجينات وتوليفها:
أولاً ، من الضروري تصميم جين اصطناعي يحتوي على تسلسل الببتيد 3X. يجب أن يحتوي هذا الجين على تسلسل الببتيد 3x Flag ، وكذلك المروجين المناسبين ، والمحترفين ، وعلامات الاختيار (مثل جينات تحمل المضادات الحيوية). يجب أن ينظر تصميم الجينات في الخصائص واحتياجات التعبير للمضيف المستهدف.
2. الجينات الاستنساخ:
بعد ذلك ، سيتم استنساخ الجينات الاصطناعية المصممة في متجهات التعبير المناسبة. وتشمل المتجهات الشائعة الاستخدام البلازميدات ، الناقلات الفيروسية ، إلخ. تتضمن عملية الاستنساخ عادة الخطوات التالية:
-تضخيم PCR: استخدام تفاعل سلسلة البوليميريز (PCR) لتضخيم تسلسل الجينات الهدف من الحمض النووي القالب.
-igestion والاتصال: يتم هضم منتجات PCR باستخدام ناقلات التعبير باستخدام النوكليز التقييدي ، ثم يتم توصيلها معًا بواسطة Ligases DNA.
-التحويل: تحويل متجه التعبير المتصلة إلى مضيفات بكتيرية مثل الإشريكية القولونية لتشكيل بلازميد مؤتلف.
-تحديد الهوية: تم تحديد البلازميدات المؤتلف من خلال PCR ، هضم الإنزيم ، تسلسل الحمض النووي ، وطرق أخرى لتأكيد أن الجين المستهدف قد تم استنساخه بنجاح في المتجه.
3. البروتين المستهدف التعبير:
نقل ناقل التعبير المبني إلى خلايا مضيفة مستهدفة ، مثل خلايا الثدييات ، وخلايا الخميرة ، وخلايا الحشرات ، وما إلى ذلك داخل الخلايا ، يتم نسخ ناقل التعبير إلى مرنا ثم يتم ترجمته إلى البروتينات . 3 x ببتيد العلم x مع البروتين المستهدف كعلامة بروتين.
4. استخراج البروتين:
جمع الخلايا المنقولة وأداء تجزئة الخلايا ، الطرد المركزي ، والعلاجات الأخرى للحصول على مستخلص البروتين الكلي.
5. البروتين المنقى:
باستخدام تقنيات تنقية التقارب مثل المناعة والكروماتوجرافيا التقارب ، تم تنقية البروتينات المستهدفة التي تحتوي على علامات ببتيد العلم 3x من المستخلص الكلي. يتضمن هذا عادةً ربط الأجسام المضادة لعلم العلم للبروتينات التي تحتوي على الببتيد 3x من العلم ، ثم فصلها باستخدام أعمدة كروماتوجرافيا التقارب أو الخرز المغناطيسي.
6. تحديد البروتينات:
تم تحديد البروتين النقي وقياسه بواسطة الكهربائي الهلام SDS-PAGE ، والمناعة المناعية ، والطيف الكتلي وغيرها من التقنيات لضمان نقاءه وسلامته.
ردود الفعل السلبية
في البحوث الطبية الحيوية والتجارب المتعلقة بالبروتين ، تلعب الببتيدات العلامة دورًا مهمًا. يمكنهم مساعدة الباحثين في تنقية البروتينات المستهدفة واكتشافها وتحديد موقعها ، مما يعزز بشكل كبير تطور علم البروتين.3xflag الببتيدهو الببتيد العلامة الشائع والمستخدم على نطاق واسع يتكون من ثلاثة تسلسل علامة العلامة المتكررة. تم تصميم علامة العلم في الأصل بواسطة Hopp et al. في عام 1988 ، وتطورت لاحقًا إلى متغيرات مثل 3xflag ، والتي لها تقارب وخصوصية عالية ويمكن أن ترتبط بالأجسام المضادة المحددة ، مما يسهل العزلة اللاحقة وتحديد الهوية. على الرغم من أن الببتيد 3xflag قد جلب العديد من وسائل الراحة في التجارب ، مثل العوامل البيولوجية الأخرى ، فقد يسبب أيضًا بعض التفاعلات السلبية.
ردود الفعل السلبية ذات الصلة بالمناعة
المناعة
تشير المناعة إلى قدرة مادة على تحفيز الجهاز المناعي للجسم لإنتاج استجابة مناعية . 3 xflag ، كجزء من الببتيد الخارجي ، قد يتم التعرف عليه بواسطة الجهاز المناعي للجسم كمكون "غير ذاتي" ، مما يؤدي إلى استجابة مناعية. على الرغم من أن تسلسل 3xflag قصير نسبيًا ، إلا أنه قد لا يزال ينشط الخلايا B والخلايا التائية ، مما يؤدي إلى إنتاج الأجسام المضادة. لا ترتبط هذه الأجسام المضادة بببتيد 3xflag المجاني فحسب ، بل قد تتعرف أيضًا على بروتينات الاندماج وترتبط بها تعبر عن علامة 3xflag ، مما يؤثر على الوظيفة الطبيعية وتوزيع بروتين الاندماج.
ردود الفعل التحسسية
رد الفعل الحساسية هو استجابة مناعية غير طبيعية ناتجة عن أن يكون الجهاز المناعي حساسًا بشكل مفرط لبعض المواد المثيرة للحساسية. قد يعاني الأفراد الأفراد من ردود الفعل التحسسية عند استخدام الببتيد 3xflag للتجريب أو العلاج. تختلف شدة أعراض التفاعلات التحسسية. قد تظهر الحالات الخفيفة مع أعراض محلية مثل الحكة والطفح الجلدي والحمامي ، في حين أن الحالات الشديدة قد تؤدي إلى ردود فعل تحسسية منهجية مثل الصدمة الحساسية ، التي تتميز بانخفاض حاد في ضغط الدم ، وصعوبة التنفس ، وفقدان الوعي ، مما يدل على تهديد خطير لسلامة الحياة.
ردود الفعل التحسسية
ترتبط آلية التفاعلات التحسسية بشكل رئيسي بالأجسام المضادة IgE في الجهاز المناعي. عندما يتلامس الجسم لأول مرة بببتيد 3xflag ، يتعرف الجهاز المناعي على أنه مسببات للحساسية ويحفز الخلايا B لإنتاج أجسام مضادة IgE محددة. هذه الأجسام المضادة IgE تعلق على سطح الخلايا البدينة و eosinophils. عندما يتلامس الجسم مع الببتيد 3xflag مرة أخرى ، فإنه يرتبط بالأجسام المضادة لـ IgE على سطح الخلية ، مما يؤدي إلى خلايا بداتية ودرابض الحمضات لإطلاق الوسطاء النشطة بيولوجيًا مثل الهستامين و leukotrienes ، مما يؤدي إلى حدوث أعراض التحسسية.
خطر الإصابة بأمراض المناعة الذاتية
قد يزيد التعرض طويل الأجل أو المتكرر للببتيد 3xflag من خطر الإصابة بأمراض المناعة الذاتية. تشير أمراض المناعة الذاتية إلى نوع من المرض الذي يهاجم فيه الجهاز المناعي للجسم عن طريق الخطأ أنسجته وأعضائه ، مما يؤدي إلى تلف الأنسجة والضعف الوظيفي . 3 قد يحفز الببتيد xflag على الجهاز المناعي على حد سواء. هذه الخلايا المناعية والأجسام المضادة لا تهاجم فقط الببتيد الأجنبي 3xflag ، ولكن أيضًا تضر عن غير قصد الأنسجة الطبيعية للجسم ، مما يؤدي إلى أمراض المناعة الذاتية. على سبيل المثال ، قد تكون بعض أمراض المناعة الذاتية مثل الذئبة الحمامية الجهازية والتهاب المفاصل الروماتويدي مرتبطًا بتفاعلات المناعة الذاتية الناجم عن المواد الخارجية. على الرغم من عدم وجود دليل واضح على أنه يشير إلى أن الببتيد 3xflag يسبب مباشرة أمراض المناعة الذاتية ، إلا أنه لا يمكن تجاهل هذا المخاطر المحتملة.
التأثير على الوظيفة الخلوية
السمية الخلوية
في بعض الدراسات التجريبية ، وجد أن تركيزات عالية من الببتيد 3xflag قد يكون لها تأثيرات سامة على الخلايا. تشمل مظاهر السمية الخلوية التغيرات في مورفولوجيا الخلايا ، وتعطيل سلامة غشاء الخلية ، والتغييرات في نشاط الإنزيم داخل الخلايا ، وتثبيط تكاثر الخلايا. قد تكون آلية عملها مرتبطة بالتفاعل بين الببتيد 3xflag وغشاء الخلية. بسبب الشحنة السالبة القوية للببتيد 3xflag ، قد يرتبط بالمكونات المشحونة إيجابياً على غشاء الخلية من خلال التفاعلات الإلكتروستاتيكية ، وتغيير نفاذية وسيولة غشاء الخلية ، مما يؤدي إلى تسرب المواد داخل الخلايا أو دخول المواد الضارة من الخارج ، مما يؤثر على الوظائف الفيزيولوجية الطبيعية للخلايا. بالإضافة إلى ذلك ، قد يدخل الببتيد 3xflag أيضًا إلى الداخل من الخلايا ، ويتداخل مع مسارات الإشارة ، وتوليف البروتين ، وغيرها من العمليات ، مما يؤدي إلى زيادة تلف الخلايا.
الآثار على مسارات الإشارة الخلوية
قد يتداخل الببتيد 3xflag مع مسارات الإشارة داخل الخلايا ويؤثر على الأنشطة الفسيولوجية الطبيعية للخلايا. يعد مسار الإشارة الخلوية مصطلحًا جماعيًا لسلسلة من الأحداث الجزيئية التي تستجيب فيها الخلايا للمنبهات الخارجية ، وتنظيم عمليات مهمة مثل نمو الخلايا ، والتمايز ، وموت الخلايا المبرمج . 3 قد تتداخل ببتيد XFLAG ، مما يؤدي إلى تغيير النشاط أو التعبير عن مسيرة الإشارة. على سبيل المثال ، قد يرتبط بمستقبلات على سطح الخلية ، مما يثبط بشكل تنافسي ربط الروابط الطبيعية للمستقبلات وحظر انتقال إشارة ؛ بدلاً من ذلك ، يمكن أن يدخل الخلية ويرتبط ببروتينات نقل الإشارة ، مما يؤثر على فسفرة البروتين ، نزع الفسفرة وعمليات التعديل الأخرى ، بالتداخل مع انتقال الإشارة وتضخيمها. قد يؤدي هذا التداخل مع مسارات الإشارة الخلوية إلى خلل وظيفي خلوي ، مما يؤثر على العمليات مثل تكاثر الخلايا ، والتمايز ، وموت الخلايا المبرمج ، والتي بدورها يمكن أن يكون لها آثار ضارة على التطور الطبيعي ووظيفة الأنسجة والأعضاء.
الآثار على التمثيل الغذائي الخلوي
التمثيل الغذائي الخلوي هو المصطلح العام لسلسلة من التفاعلات الكيميائية التي تحدث داخل الخلايا ، مما يوفر أساس الطاقة والمواد لأنشطة الحياة الخلوية . 3 قد يؤثر الببتيد xflag على عمليات التمثيل الغذائي الخلوي ، ويتداخل مع إنتاج الطاقة الخلوية وتوليف المواد. على سبيل المثال ، قد يؤثر ذلك على وظيفة الميتوكوندريا ، والتي هي المواقع الرئيسية لتنفس الهوائية وإنتاج الطاقة في الخلايا . 3 قد يغير Xflag الببتيد XFLAG ، مما يؤثر على نفاذية السلسلة التنفسية للميتوكوندريا ، مما يؤدي إلى التفاعل مع توريد الخلية المفرطة. بالإضافة إلى ذلك ، قد يتداخل الببتيد 3xflag أيضًا مع العمليات داخل الخلايا مثل استقلاب الجلوكوز والتمثيل الغذائي للدهون ، مما يؤثر على توازن تخليق المواد والتحلل في الخلايا ، وله تأثير سلبي على الوظائف الفسيولوجية الطبيعية للخلايا.
احترافي
نحن نقدم مجموعة متنوعة من مكونات ناقل الحركة ، بما في ذلك السبلات ، وسلاسل الأسطوانة ، والتروس ، والقران ، والرفوف ، والمراكز ، والبكرات ، والأكمام التفتت ، ومقاعد تحمل ، وأكثر من ذلك.
الوسم : 3xflag الببتيد CAS 402750-12-3 ، الموردين ، المصنعين ، المصنع ، الجملة ، شراء ، السعر ، الجزء الأكبر ، للبيع