واحدة من الشركات المصنعة والموردة الأكثر خبرة لـ 3xflag الببتيد cas 402750-12-3 في الصين. مرحبًا بكم في الجملة عالية الجودة 3xflag الببتيد cas 402750-12-3 للبيع هنا من مصنعنا. تتوفر خدمة جيدة وسعر معقول.
3XFLAG الببتيدهو تسلسل علامة الببتيد مهم يستخدم على نطاق واسع في التعبير البروتيني وعمليات التنقية في البحوث الطبية الحيوية. الصيغة الجزيئية C120H169N31O49S، CAS 402750-12-3. يتكون من 23 حمضًا أمينيًا، ويحتوي تسلسله على ثلاثة أشكال متكررة من Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp، والتي تمنحه ميزات هيكلية محددة.
لديه قابلية ذوبان جيدة في مذيبات محددة. على سبيل المثال، في DMSO، تكون قابليته للذوبان عالية، مما يجعله مناسبًا للعمليات والتجارب في المحلول. بالإضافة إلى ذلك، يمكنه أيضًا تحقيق تأثير جيد في الذوبان في الماء من خلال التسخين الخفيف. كما أن لديها بعض الخصائص الخاصة. على سبيل المثال، يتمتع بقدرة استضدية وتفاعلية جيدة، ويمكنه الارتباط بأجسام مضادة محددة مضادة لـ FLAG. هذه القدرة الملزمة تجعلها قابلة للتطبيق على نطاق واسع في تجارب مثل الترسيب المناعي. من خلال الارتباط التنافسي بالأجسام المضادة لـ Anti FLAG، يمكن التخلص من البروتين المعبر عن اندماج FLAG الذي يرتبط بالأجسام المضادة لـ Anti FLAG أثناء الترسيب المناعي، وبالتالي تحقيق توطين البروتين المستهدف واكتشافه وتنقيته.
|
أغطية زجاجات وفلين مخصصة:
|
|
|
الصيغة الكيميائية |
C120H169N31O49S |
|
الكتلة الدقيقة |
2860 |
|
الوزن الجزيئي |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
التحليل العنصري |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |
3XFLAG الببتيدهي علامة تستخدم في أبحاث البروتين، وتتكون من 8 أحماض أمينية بالتسلسل DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. وتتمثل وظيفتها الرئيسية في العمل كعلامة للتعبير عن البروتين وتنقيته، مما يوفر وسيلة مريحة وفعالة في البحث.
1. تنقية الألفة:
يمكن استخدامه كملصق لتنقية البروتين، ومن خلال تقاربه العالي مع الأجسام المضادة لـ FLAG، يمكن تنقية البروتين المستهدف بسهولة. عادة، يتم نقل البروتين المستهدف إلى خلايا باستخدام ناقل تعبير يحتوي على 3X FLAG PEPTIDE، ثم يتم تنقيته عن طريق الألفة باستخدام الأجسام المضادة لـ FLAG للحصول بسرعة وكفاءة على بروتين مستهدف عالي النقاء.
2. الاختبارات المناعية:
ونظرًا لقدرته المناعية العالية، يمكن استخدامه للكشف عن تعبير البروتين وتوطينه. من خلال استخدام أجسام مضادة محددة مضادة لـ FLAG، يمكن إجراء تقنيات تجريبية مثل النشاف المناعي وتلطيخ التألق المناعي للكشف بسرعة ودقة عن مستوى التعبير وتوزيع البروتينات المستهدفة.
3. تصفية الاستنساخ:
ويمكن استخدامه أيضًا لتسهيل فحص استنساخ البروتين. في عملية بناء نواقل التعبير البروتيني، فإن ربط التسلسل الجيني للبروتين المستهدف بتسلسل 3XFLAG يمكن أن يسهل فحص الحيوانات المستنسخة الإيجابية مع البروتين المستهدف من خلال الكشف المناعي وطرق أخرى، وبالتالي تسريع عملية أبحاث وظائف البروتين.
4. الترسيب المناعي:
ويمكن استخدامه أيضًا في تجارب الترسيب المناعي للبروتين. من خلال ربط البروتينات التي تحتوي على 3X علامات FLAG PEPTIDE بالأجسام المضادة لـ FLAG، ثم استخدام مواد الامتزاز مثل البروتين A/G agarose أو الخرز المغناطيسي، يمكن ترسيب البروتين المستهدف وشركائه المتفاعلين بشكل انتقائي من مستخلصات الخلايا لدراسة شبكة تفاعل البروتين.
5. فحص المخدرات:
ويمكن استخدامه أيضًا في أبحاث فحص المخدرات. من خلال دمج علامة 3X FLAG PEPTIDE مع البروتين محل الاهتمام، يمكن تحقيق فحص إنتاجي عالي للبروتين. يمكن استخدام طريقة الفحص هذه لاكتشاف أهداف دوائية جديدة، وتقييم تفاعلات البروتين الدوائي، وما إلى ذلك.
6. أبحاث وظائف البروتين:
لا يؤثر إدخال الملصقات بشكل كبير على البنية الطبيعية ووظيفة البروتينات، وبالتالي يمكن استخدامها لدراسة الوظائف البيولوجية، والتوطين تحت الخلوي، والتفاعلات، ونقل الإشارة للبروتينات. من خلال تقديم علامة 3X FLAG PEPTIDE،-يمكن إجراء بحث متعمق حول الخصائص البيولوجية للبروتينات، مما يساعد على الكشف عن آليات عملها في البيولوجيا الخلوية وعلم وظائف الأعضاء.
3XFLAG الببتيدهو ببتيد يحتوي على 8 أحماض أمينية، بالتسلسل DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. يتم استخدامه بشكل شائع كعلامة بروتينية لتنقية البروتينات المستهدفة واكتشافها والبحث عنها بسهولة. وفي عملية التخليق الحيوي، يمكن تحضيره من خلال التخليق الكيميائي أو طرق الهندسة الوراثية. فيما يلي الخطوات التفصيلية لطرق الهندسة الوراثية:
1. تصميم وتوليف الجينات:
أولاً، من الضروري تصميم جين اصطناعي يحتوي على تسلسل 3X FLAG PEPTIDE. يجب أن يحتوي هذا الجين على تسلسل 3X FLAG PEPTIDE، بالإضافة إلى المروجين المناسبين والإنهاء وعلامات الاختيار (مثل جينات تحمل المضادات الحيوية). يجب أن يأخذ تصميم الجينات في الاعتبار الخصائص واحتياجات التعبير للمضيف المستهدف.
2. الاستنساخ الجيني:
بعد ذلك، سيتم استنساخ الجينات الاصطناعية المصممة في ناقلات التعبير المناسبة. تشمل النواقل شائعة الاستخدام البلازميدات والنواقل الفيروسية وما إلى ذلك. وتتضمن عملية الاستنساخ عادةً الخطوات التالية:
-تضخيم PCR: استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لتضخيم تسلسل الجين المستهدف من قالب DNA.
-الهضم والاتصال: يتم هضم منتجات PCR باستخدام ناقلات التعبير باستخدام نوكليازات التقييد الداخلية، ثم يتم ربطها معًا بواسطة روابط الحمض النووي.
-التحول: تحويل ناقل التعبير المتصل إلى مضيفات بكتيرية مثل الإشريكية القولونية لتكوين بلازميد مؤتلف.
-التحديد: تم التعرف على البلازميدات المؤتلفة من خلال تفاعل البوليميراز المتسلسل، وهضم الإنزيم، وتسلسل الحمض النووي، وطرق أخرى للتأكد من أن الجين المستهدف قد تم استنساخه بنجاح في الناقل.
3. التعبير عن البروتين المستهدف:
قم بنقل ناقل التعبير المُنشأ إلى الخلايا المضيفة المستهدفة، مثل خلايا الثدييات، وخلايا الخميرة، وخلايا الحشرات، وما إلى ذلك. داخل الخلايا، يتم نسخ ناقل التعبير إلى mRNA ثم ترجمته إلى بروتينات . 3X سيتم التعبير عن FLAG PEPTIDE مع البروتين المستهدف كعلامة بروتين.
4. استخلاص البروتين :
جمع الخلايا المصابة بالعدوى وإجراء تجزئة الخلايا والطرد المركزي والعلاجات الأخرى للحصول على خلاصة البروتين الكلي.
5. البروتين المنقى :
باستخدام تقنيات تنقية التقارب مثل الترسيب المناعي والكروماتوغرافيا التقاربية، تمت تنقية البروتينات المستهدفة التي تحتوي على 3X FLAG PEPTIDE من المستخلص الكلي. يتضمن هذا عادةً ربط الأجسام المضادة لـ FLAG بالبروتينات التي تحتوي على 3X FLAG PEPTIDE، ثم فصلها باستخدام أعمدة كروماتوجرافيا متقاربة أو خرزات مغناطيسية.
6. تحديد البروتينات:
تم التعرف على البروتين المنقى وقياس كميته بواسطة SDS-PAGE الكهربائي للهلام، والتنقيط المناعي، وقياس الطيف الكتلي وغيرها من التقنيات لضمان نقائه وسلامته.
ردود الفعل السلبية
في الأبحاث الطبية الحيوية والتجارب المتعلقة بالبروتين، تلعب الببتيدات الوسمية دورًا حاسمًا. يمكنهم مساعدة الباحثين في تنقية البروتينات المستهدفة وكشفها وتحديد موقعها، مما يعزز بشكل كبير تطوير علم البروتين.3XFLAG الببتيدعبارة عن ببتيد شائع ومستخدم على نطاق واسع ويتكون من ثلاث تسلسلات متكررة لعلامة FLAG. تم تصميم علامة FLAG في الأصل بواسطة Hopp et al. في عام 1988، وتم تطويره لاحقًا إلى متغيرات مثل 3XFLAG، التي تتمتع بقدرة عالية على التقارب والخصوصية ويمكن أن ترتبط بأجسام مضادة محددة، مما يسهل العزلة والتعرف لاحقًا. على الرغم من أن 3XFLAG قد جلب العديد من وسائل الراحة في التجارب، مثل العوامل البيولوجية الأخرى، إلا أنه قد يسبب أيضًا بعض ردود الفعل السلبية.
ردود الفعل السلبية المرتبطة بالمناعة
المناعة
تشير المناعة إلى قدرة المادة على تحفيز جهاز المناعة في الجسم لإنتاج استجابة مناعية. 3XFLAG، باعتباره قطعة ببتيد خارجية، قد يتعرف عليها الجهاز المناعي للجسم على أنها مكون "غير ذاتي"، وبالتالي يؤدي إلى استجابة مناعية. على الرغم من أن تسلسل 3XFLAG قصير نسبيًا، إلا أنه في بعض الحالات قد يستمر في تنشيط الخلايا البائية والخلايا التائية، مما يؤدي إلى إنتاج الأجسام المضادة. لا ترتبط هذه الأجسام المضادة بـ 3XFLAG الحر فحسب، بل قد تتعرف أيضًا على بروتينات الاندماج التي تعبر عن علامة 3XFLAG وترتبط بها، مما يؤثر على الوظيفة الطبيعية وتوزيع بروتين الاندماج.
ردود الفعل التحسسية
رد الفعل التحسسي هو استجابة مناعية غير طبيعية ناجمة عن حساسية الجهاز المناعي المفرط لبعض مسببات الحساسية. قد يتعرض الأفراد لتفاعلات حساسية عند استخدام 3XFLAG للتجريب أو العلاج. تختلف شدة أعراض الحساسية. قد تظهر الحالات الخفيفة مع أعراض موضعية مثل الحكة والطفح الجلدي والحمامي، في حين أن الحالات الشديدة قد تؤدي إلى تفاعلات حساسية جهازية مثل صدمة الحساسية، والتي تتميز بانخفاض حاد في ضغط الدم وصعوبة التنفس وفقدان الوعي، مما يشكل تهديدًا خطيرًا لسلامة الحياة.
ردود الفعل التحسسية
ترتبط آلية تفاعلات الحساسية بشكل رئيسي بالأجسام المضادة IgE الموجودة في الجهاز المناعي. عندما يتلامس الجسم لأول مرة مع 3XFLAG، يتعرف عليه الجهاز المناعي كمسبب للحساسية ويحفز الخلايا البائية لإنتاج أجسام مضادة IgE محددة. تلتصق هذه الأجسام المضادة IgE بسطح الخلايا البدينة والحمضات. عندما يتلامس الجسم مع 3XFLAG مرة أخرى، فإنه يرتبط بالأجسام المضادة IgE الموجودة على سطح الخلية، مما يؤدي إلى إطلاق الخلايا البدينة والحمضات لوسطاء نشطين بيولوجيًا مثل الهيستامين والليكوترين، مما يؤدي إلى ظهور أعراض الحساسية.
خطر الإصابة بأمراض المناعة الذاتية
قد يؤدي التعرض طويل الأمد أو المتكرر لـ 3XFLAG إلى زيادة خطر الإصابة بأمراض المناعة الذاتية. تشير أمراض المناعة الذاتية إلى نوع من الأمراض يهاجم فيه الجهاز المناعي للجسم أنسجته وأعضائه عن طريق الخطأ، مما يؤدي إلى تلف الأنسجة وضعف وظيفي. 3قد يحفز XFLAG الجهاز المناعي على إنتاج أجسام مضادة متفاعلة وخلايا T من خلال آلية محاكاة جزيئية، حيث يكون تسلسل الأحماض الأمينية الخاص به مشابهًا لتسلسل بروتينات معينة في الجسم نفسه.
هذه الخلايا المناعية والأجسام المضادة لا تهاجم 3XFLAG الأجنبي فحسب، بل تلحق الضرر أيضًا عن غير قصد بأنسجة الجسم الطبيعية، مما يؤدي إلى أمراض المناعة الذاتية. على سبيل المثال، قد تكون بعض أمراض المناعة الذاتية مثل الذئبة الحمامية الجهازية والتهاب المفاصل الروماتويدي مرتبطة بتفاعلات المناعة الذاتية الناجمة عن مواد خارجية. على الرغم من عدم وجود دليل واضح حاليًا يشير إلى أن 3XFLAG يسبب بشكل مباشر أمراض المناعة الذاتية، إلا أنه لا يمكن تجاهل هذا الخطر المحتمل.
التأثير على الوظيفة الخلوية
في بعض الدراسات التجريبية، وجد أن التركيزات العالية من 3XFLAG قد يكون لها تأثيرات سامة على الخلايا. تشمل مظاهر السمية الخلوية تغيرات في شكل الخلية، واختلال سلامة غشاء الخلية، وتغيرات في نشاط الإنزيم داخل الخلايا، وتثبيط تكاثر الخلايا. قد تكون آلية عملها مرتبطة بالتفاعل بين 3XFLAG وغشاء الخلية. بسبب الشحنة السلبية القوية لـ 3XFLAG،
قد يرتبط بمكونات موجبة الشحنة على غشاء الخلية من خلال التفاعلات الكهروستاتيكية، مما يغير نفاذية وسيولة غشاء الخلية، مما يؤدي إلى تسرب المواد داخل الخلايا أو دخول مواد ضارة من الخارج، مما يؤثر على الوظائف الفسيولوجية الطبيعية للخلية. بالإضافة إلى ذلك، قد يدخل 3XFLAG أيضًا إلى داخل الخلايا، ويتداخل مع مسارات الإشارات، وتخليق البروتين، وعمليات أخرى، مما يزيد من تفاقم تلف الخلايا.
التأثيرات على مسارات الإشارات الخلوية
قد يتداخل 3XFLAG مع مسارات الإشارات داخل الخلايا ويؤثر على الأنشطة الفسيولوجية الطبيعية للخلايا. مسار الإشارات الخلوية هو مصطلح جماعي لسلسلة من الأحداث الجزيئية التي تستجيب فيها الخلايا للمحفزات الخارجية، وتنظم العمليات المهمة مثل نمو الخلايا، والتمايز، وموت الخلايا المبرمج. 3قد يتداخل XFLAG مع النقل الطبيعي لمسارات الإشارة من خلال التفاعل مع الجزيئات الرئيسية في مسار الإشارة، مما يغير مستويات النشاط أو التعبير لجزيئات الإشارة.
على سبيل المثال، قد يرتبط بمستقبلات على سطح الخلية، مما يمنع بشكل تنافسي ربط الروابط الطبيعية بالمستقبلات ويمنع نقل الإشارة؛ وبدلاً من ذلك، يمكن أن يدخل الخلية ويرتبط ببروتينات نقل الإشارة، مما يؤثر على فسفرة البروتين ونزع الفسفرة وعمليات التعديل الأخرى، مما يتداخل مع نقل الإشارة وتضخيمها. قد يؤدي هذا التداخل في مسارات الإشارات الخلوية إلى خلل وظيفي خلوي، مما يؤثر على عمليات مثل تكاثر الخلايا، والتمايز، وموت الخلايا المبرمج، والذي بدوره يمكن أن يكون له آثار ضارة على التطور الطبيعي ووظيفة الأنسجة والأعضاء.
التأثيرات على التمثيل الغذائي الخلوي
التمثيل الغذائي الخلوي هو المصطلح العام لسلسلة من التفاعلات الكيميائية التي تحدث داخل الخلايا، مما يوفر الطاقة والأساس المادي لأنشطة الحياة الخلوية. 3قد يؤثر XFLAG على عمليات التمثيل الغذائي الخلوي، ويتداخل مع إنتاج الطاقة الخلوية وتخليق المواد. على سبيل المثال، قد يؤثر على وظيفة الميتوكوندريا، والتي تعد المواقع الرئيسية للتنفس الهوائي وإنتاج الطاقة في الخلايا. 3قد يغير XFLAG نفاذية غشاء الميتوكوندريا وإمكاناته من خلال التفاعل مع البروتينات أو الدهون الموجودة على الغشاء، مما يؤثر على وظيفة سلسلة الجهاز التنفسي للميتوكوندريا وتخليق ATP،
مما يؤدي إلى عدم كفاية إمدادات الطاقة الخلوية. فضلاً عن ذلك،3XFLAG الببتيدقد يتداخل أيضًا مع العمليات داخل الخلايا مثل استقلاب الجلوكوز واستقلاب الدهون، مما يؤثر على توازن تخليق المواد وتحللها في الخلايا، ويكون له تأثير سلبي على الوظائف الفسيولوجية الطبيعية للخلايا.
الأسئلة المتداولة
ما هو العلم 3X؟
+
-
3X FLAG Peptide عبارة عن ببتيد صناعي مكون من 23 بقايا حمض أميني. يتم تكرار نموذج Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp ثلاث مرات في الببتيد. تشكل ثمانية أحماض أمينية في الطرف C- تسلسل FLAG الكلاسيكي (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
ما الفرق بين علامة العلم- وعلامة 3xflag؟
+
-
علامة العلم- عبارة عن تسلسل واحد من 8 أحماض أمينية شائع الاستخدام في تطبيقات الترسيب المناعي، واللطخة الغربية، والتألق المناعي. في المقابل، تحتوي علامة 3x Flag- على 22 حمضًا أمينيًا، مما يمنحها تقاربًا أكبر للأجسام المضادة لـ-Flag، ويجعلها مفيدة بشكل خاص لسير عمل تنقية البروتين.
كيفية حل 3X FLAG؟
+
-
لإعداد محلول مخزون، يذوب في TBS (50 ملي مولار تريس - حمض الهيدروكلوريك، درجة الحموضة 7.4، مع 150 ملي مول كلوريد الصوديوم) بتركيز 5 ملغ/مل. قسامة وتخزينها في -20 درجة. لا ينصح بالتجميد والذوبان المتكررين.
الوسم : 3xflag الببتيد cas 402750-12-3، الموردين، الشركات المصنعة، مصنع، بالجملة، شراء، السعر، بالجملة، للبيع